Diagnóstico para Detectar el Virus de la Gastroenteritis Porcina Transmisible por Técnicas de Microscopía Óptica y Electrónica de Transmisión

DOI : http://dx.doi.org/10.4067/S0717-95022013000200059
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Martins, A. M. C. R. P. F.; Bersano, J. G.; Ogata, R.; Amante, G.; Nastari, B. D. B.; Catroxo, M. H. B.

Resumen

La gastroenteritis transmisible porcina se caracteriza por ser una enfermedad altamente contagiosa y aguda, causa- da por virus de la familia Coronaviridae, género Coronavirus. Su forma epizoótica puede alcanzar una tasa de hasta 100% de mortalidad en lechones con menos de dos semanas de edad, como resultado de deshidratación severa. En este trabajo se recogieron 75 fragmentos de intestino delgado y muestras de heces de 75 cerdos autopsiados. Las muestras se congelaron y se enviaron al Laboratorio de Microscopía Electrónica, del Instituto Biológico, SP, Brasil, para el análisis histológico y por microscopía electrónica de transmisión. Por la técnica histológica de H&E fue observado atrofia y necrosis de la vellosidades además de la destrucción de los enterocitos en 35 (46,6%) de las 75 muestras de fragmentos del intestino delgado. Por inmunohistoquímica 19 (25,3%) de los fragmentos se tiñeron positivamente por el DAB en la reacción Ag-Ac (MabTGEV). En 19 (25,3%) muestras positivas mediante hibridación in situ, se observó tinción marrón de los enterocitos, principalmente en las células epiteliales de las vellosidades. Por la técnica de coloración negativa, se observaron partícu- las de coronavirus, encapsuladas, pleomórficas con proyecciones radiales típicas, en forma de corona solar, midiendo alrededor de 140 nm de diámetro en 21 (28%) muestras de fragmentos del intestino delgado y en 16 (21,3%) muestras de heces. En cortes ultra finos de 21 (28%) fragmentos de intestino delgado fueron visualizadas partículas de coronavirus completas con 80 nm de diámetro entre las microvellosidades y en el citoplasma de las células epiteliales y partículas inmaduras de 60 nm de diámetro brotando de las membranas celulares y del retículo endoplasmático rugoso y en el interior de las vacuolas. En 19 (25,3%) de las 75 muestras de intestino delgado, la interacción antígeno-anticuerpo se caracterizó por agregación de las partículas virales en la técnica de microscopía inmunoelectrónica. En la técnica de inmunocitoquímica, la interacción antígeno-anticuerpo fue fuertemente reforzada por las densas partículas de oro coloidal sobre el coronavirus en 19 (25,3%) de los 75 fragmentos del intestino delgado examinados.

PALABRAS CLAVE: Gastroenteritis Transmisible Porcina; Coronavirus; Histopatología; Microscopía Electrónica de Transmisión.

Como citar este artículo

MARTINS, A. M. C. R. P. F.; BERSANO, J. G.; OGATA, R.; AMANTE, G.; NASTARI, B. D. B.; CATROXO, M. H. B. Diagnosis to detect porcine transmissible gastroenteritis virus (TGEV) by optical and transmission electron microscopy techniques. Int. J. Morphol., 31(2):706-715, 2013.