Evaluación de la Ultraestructura de los Ovocitos de Ratón Después de la Vitrificación Antes y Después de la Maduración in vitro

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Maryam Izadi; Seyed Hassan Eftekhar Vaghefi; Hakimeh Akbari; Majid Asadi Shekari & Tahmineh Mokhtari

Resumen

La vitrificación es un proceso físico en el que la solución concentrada de crioprotectores, después de la ex- posición al frío extremo sin formación de cristales de hielo en las células vivas, se convierte en estado de cristal. En este estudio, se evaluaron la velocidad de maduración y la ultraestructura de los ovocitos de ratón seguidos por la vitrificación antes o después de la maduración in vitro (IVM). Se obtuvieron un total de 373 ovocitos, de vesículas germinales de ovarios, y se dividieron en tres grupos de IVM vitrificados, IVM e IVM frescos. Diez ovocitos metafase II se obtuvieron a partir de tubas uterinas y se consideraron como el grupo de control. Los ovocitos en grupos vitrificados fueron vitrificados por Cryotop usando medio de vitrificación y mantenidos en nitrógeno líquido. El medio de maduración fue a-MEM suplementado con rFSH + hCG. Después de 24-48 h de incubación, fueron observados en los ovocitos la maduración nu- clear y cambios ultraestructurales utilizando microscopía electrónica de transmisión (MET). La tasa de maduración de los ovocitos en el grupo vIVM fue significativamente más baja que en el grupo IVMv, cuando los dos grupos se compararon con los que tenían la mayor madurez. La evaluación de la ultraestructura de los cuatro grupos mostró que el número de gránulos corticales, microvellosidades y acúmulos de mitocondrias-SER en el grupo vIVM fue el más bajo y el más alto entre el número de vacuolas. La zona pelúcida fue más oscura en dos grupos de congelación vIVM e IVMv, que en el grupo control. La mayoría de los grupos, similares al grupo de control, fueron los grupos vIVM, IVMv y, finalmente, el grupo vIVM, respectivamente. De acuerdo con los resultados, el procedimiento de IVM es más eficiente cuando se realiza antes de la vitrificación de ovocitos.

PALABRAS CLAVE: Vitrificación; Preservación fertilidad; Criopreservación; Maduración in vitro; Ultraestructura.

Como citar este artículo

IZADI, M.; EFTEKHAR, V. S. H.; AKBARI, H.; ASADI, S. M. & MOKHTARI, T. Assessment of mouse oocytes ultrastructure following vitrification before and after in vitro maturation. Int. J. Morphol., 36(1):180-188, 2018.